銷售咨詢熱線：
15502280048
以下是ELISA實驗中空白孔顯現(xiàn)陽性的可能原因及解決方案分析：
一、主要技術(shù)原因?
交叉污染?
手工洗板時相鄰標(biāo)準(zhǔn)品孔液體倒流至空白孔(常見于甩板操作不規(guī)范)
加樣槍頭未更換導(dǎo)致樣本/試劑殘留污染
封閉不充分?
未封閉的板子非特異性吸附一抗，后續(xù)結(jié)合酶標(biāo)二抗顯色
封閉液含可被一抗結(jié)合的蛋白(如BSA與某些抗體存在交叉反應(yīng))
試劑問題?
酶標(biāo)二抗?jié)舛冗^高或非特異性結(jié)合
底物溶液污染或未避光保存導(dǎo)致自發(fā)顯色
二、解決方案?
問題類型? ?糾正措施?
操作污染? 改用自動化洗板機;甩板時保持45°傾斜，避免液體飛濺
封閉優(yōu)化? 更換封閉液(如5%脫脂牛奶)，延長封閉時間至2小時以上
試劑驗證? 使用前離心濃縮抗體;更換不同批號底物溶液
系統(tǒng)驗證? 單獨測試空白孔(僅加底物/終止液)排除酶標(biāo)板自身缺陷
三、實驗設(shè)計建議?
增設(shè)對照?
增加"僅二抗孔"(不加一抗)區(qū)分污染來源
每板設(shè)置3個空白孔檢測重復(fù)性
流程優(yōu)化?
顯色階段嚴格避光，控制反應(yīng)時間在15分鐘內(nèi)
采用預(yù)包被板(減少手工操作變量)
注：若問題持續(xù)存在，建議進行抗體交叉反應(yīng)測試或更換試劑盒品牌
注：以上資料僅供參考，具體詳情來咨詢技術(shù) 老師或品牌供應(yīng)商。
天津天正信達供應(yīng)：RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實驗耗材，我司擁有一支覆蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等專業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設(shè)備齊全的實驗技術(shù)平臺，主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機、全波長酶標(biāo)儀、高速落地離心機和qPCR儀等大型儀器設(shè)備。
電話
微信號
