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以下是ELISA樣本制備的關鍵步驟及注意事項，綜合實驗規范與常見問題：
一、樣本類型處理要點?
血清制備?
采集后室溫靜置1小時(凝血)，4℃ 2500rpm離心10分鐘取上清
避免溶血(血紅素干擾HRP顯色)和細菌污染
血漿處理?
使用EDTA抗凝管采集，30分鐘內4℃離心分離
肝素抗凝劑可能干擾檢測，需參照試劑盒要求選擇
細胞培養上清?
1500rpm離心10分鐘去除細胞碎片，分裝后-80℃保存
尿液/腦脊液?
10000×g離心2分鐘，去除沉淀物后檢測
二、保存與凍存規范?
樣本類型? ?短期保存? ?長期保存? ?禁忌?
血清/血漿 2-8℃ 48小時 -80℃(6個月) 反復凍融>3次
細胞上清 4℃ 24小時 -80℃(分裝) 室溫放置>30分鐘
三、關鍵注意事項?
防污染措施?
使用無菌離心管，操作全程在冰上進行(除凝血步驟)
細菌污染樣本需離心后取上清重新檢測
離心參數控制?
血清/血漿：2500-3000rpm，10分鐘
細胞裂解物：12000-13000rpm，5-10分鐘
特殊樣本處理?
高脂血樣本需超速離心(10000×g 15分鐘)
四、常見問題解決方案?
假陽性高?：檢查溶血/脂血情況，更換抗凝劑類型
重復性差?：確保分裝凍存，避免凍融循環
濃度異常?：預實驗確定樣本稀釋倍數(建議1:5-1:10)
通過規范操作可顯著提升檢測準確性。
注：以上資料僅供參考，不同品牌產品可能存在設計差異，操作前建議參考說明書?。
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